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液相色谱仪的分离系统由色谱柱、色谱柱的连接部件、柱恒温装置和固定相等组成。一、色谱柱:液相色谱仪的色谱柱一般用内部抛光的不锈钢制成,柱内径为1~4mm,柱长为10~50cm,柱形多为直形,内部充满微粒固定相。近年来,由于高性能填充剂的细粒化,3~5um微粒填料的使用,趋向柱内径为...
北京创新通恒科技LC3000U型高效液相色谱仪是一款基于嵌入式操作系统,全新设计的新一代色谱仪系统。本系统主要由P3000U.UV3000U(或UV3000UD)组成,外观美观大方,操作便利,运行可靠,是常规分析实验室常用的分析仪器。本系统可广泛的用于医药、制药、食品、卫生防疫、环保等多个领域。下面讲讲使用过程可能会遇到的症状及处理方法:症状:(一)保留时间变化可能的原因:解决方法1.柱温变化:柱恒温;2.等度与梯度间未能充分平衡:至少用10倍柱体积的流动相平衡柱;3.缓冲液...
HPLC色谱概述液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项快速的分析分离技术,是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationphase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的,其以液体作为流动相,并采用颗粒极细的固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与...
高效液相色谱法的发展历史1960年代,由于气相色谱对高沸点有机物分析的局限性,为了分离蛋白质、核酸等不易气化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末科克兰(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人开发了世界一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱的时代。高效液相色谱使用粒径更细的固定相填充色谱柱,提高色谱柱的塔板数,以高压驱动流动相,使得经典液相色谱需要数日乃至数月完成的分离工作得以在几个小时甚至几十分钟内完成。1...
高效液相色谱法的原理:高效液相色谱(HPLC)法是以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广,不受分析对象挥发性和热稳定性的限制,因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中,可用气相色谱分析的约占20%,而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱和气相色谱在基本理论方面没有显著不同,它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质的差别。高效液相色谱法的构造:可分为”高压输液泵”、”色谱柱”、"进样器”...
1、制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;2、低压色谱(LPLC)柱压一般低于5bar(或75psi)。低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成,可以连续化,实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。对于大多数在紫外区有吸收的物质,光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂,粒径一般...
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